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本试剂盒采用DNase I和独特的反应液，消化后不需要繁琐的苯酚/氯仿抽提灭活，可直接用于反转录反应，使用起来非常快速，方便。

DNase I是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶。DNase I水解单链或双链DNA后的产物，5'端为磷酸基团，3'端为羟基。DNase I活性依赖于钙离子，并能被镁离子或二价锰离子激活。镁离子存在条件下，DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点；二价锰离子存在条件下，DNase I可在同一位点剪切DNA双链，形成平末端，或1～2个核苷酸突出的粘末端。

• 制备不含DNA的RNA样品；
  
• RT-PCR反应前RNA样品中去除基因组DNA等可能的DNA污染；
  
• 体外T7、T3、SP6等RNAPolymerases催化的RNA转录后去除DNA模板；
  
• DNase I footprinting研究DNA-蛋白质相互作用；
  
• 缺口平移(nick translatioin)；产生DNA随机片断文库；
  
• 细胞凋亡TUNEL检测中部分剪切基因组DNA作为阳性对照。

37℃，10分钟内，将能够完全降解1μg pBR322质粒DNA所需的酶量定义为1个活性单位。


大肠杆菌表达的31kd重组蛋白。

组分	规格
RNase-free DNase I(3U/μL)	0.5mL
10×DNase Buffer	1mL
EDTA Stopper	0.5mL

保存：-20℃，有效期1年。


50mM Tris-HCl (pH7.5)，10mM CaCl₂，50% (v/v)glycerol。


10×DNase Buffer：
100mM Tris-HCl (pH7.5 at 25℃)，25mM MgCl₂，1mM CaCl₂。


不含其它DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶。


每微升DNase I最多处理不超过3μg RNA。如果需要RNA较多，需要根据RNA的处理量按比例放大DNase I、10×DNase Buffer使用量和反应体积。如果处理后需要得到纯净RNA，可以使用RNA纯化试剂盒(货号：ALH435)在第2步后（37℃孵育30分钟后）直接清洁纯化（不需要加EDTA Stopper和65℃孵育10分钟的步骤了）。

• 在RNAse free管里面加入以下成分
  

  成分	用量
  RNA	<3μg (<8μL)
  10×DNase Buffer	1μL
  DNase I	1μL
  RNase-free water	至10μL

  
  
• 37℃孵育30分钟。
  
• 加1μL EDTA Stopper。
  
• 65℃孵育10分钟，灭活DNase I。
  
• 取适量或者全部10μL的处理过的RNA直接用于反转录。

相关搜索：DNA消化试剂盒(DNase I)，RNase-free DNase I，DNA digestion kit